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Structure - Fonction D'Une Atpase de Type P (in French)
Delavoie, Franck
Synopsis "Structure - Fonction D'Une Atpase de Type P (in French)"
La compréhension au niveau atomique du mécanisme de transport des ions calcium par une ATPase de type P, la Ca-ATPase, nécessite la caractérisation structurale des différentes conformations mises en évidence par les études fonctionnelles. Si différents cristaux existent pour les formes non-phosphorylé, nous ne disposions pas jusqu'à ce jour de cristaux d'une forme phosphorylée covalente. La formation de ce dérivé nécessite d'avoir une Ca-ATPase marquée par une sonde fluorescente. La stabilité du dérivé est mise en évidence à l'aide de [32P]acétylphosphate. Des cristaux 2D de type tubulaire sont produits et après un traitement d'images de cryomicroscopie électronique, la structure 3D d'un dérivé phosphorylé covalent d'une ATPase de type P à 8À de résolution a été générée. La comparaison de cette nouvelle structure avec les autres structures existantes suggère des modifications au niveau ou positionnement des domaines cytoplasmiques. Des expériences de trypsinisation et de chromatographie sur une colonne Red120, ont permis d'affiner ces observations. Les liens entre ces modifications structurales et le mécanisme de transport de calcium couplé à l'hydrolyse d ATP sont discutés.
